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2018-蛋白质组学在免疫修饰磁珠对外泌体高效捕获和温和释放分子机制的研究-四川大学-Nanoscale(IF:7.23)

Immuno-modified superparamagnetic nanoparticles via host-guest interactions for high-purity capture and mild release of exosomes.
Cai, S., Luo, B., Jiang, P., Zhou, X., Lan, F., Yi, Q., & Wu, Y.
Nanoscale, 2018.

外泌体的研究对于癌症的诊断和预后具有重要意义,其中,由于外泌体在体液中的浓度极低,因此无损伤地分离外泌体是至关重要的一步。本研究通过β-环糊精(β-CD)和4-氨基偶氮苯(AAB)之间的客体相互作用,将抗体与超顺磁性纳米粒子结合,成功构建了免疫亲和超顺磁性纳米粒子(IS-NP)。细胞培养上清液或体液中的外泌体可以被IS-NP有效捕获,然后被竞争性宿主分子α-CD轻度洗脱。 IS-NPs从含有变化浓度的外泌体(每毫升1011-107个外泌体)的模型样品中捕获了约80%的外泌体。洗脱后,根据提取的RNA含量计算,捕获的外泌体的释放效率高达86.5%。通过IS-NPs分离的外泌体,常规超速离心(UC),基于聚乙二醇(PEG)的沉淀和市售试剂盒之间进行比较,以检查IS-NP外泌体分离的性能。被IS-NP捕获的外泌体的颗粒/蛋白质比率(8.8±1.3×109)比UC(1.1±0.4×109)高八倍,是基于PEG的沉淀的两倍(3.7±0.8×109)和市售试剂盒(3.2±0.8×109)分离得到的,揭示了IS-NP比所有其他三种方法都能产生更多纯度更高的外泌体。细胞摄取实验表明,被IS-NP捕获的外泌体保留了其结构和功能完整性,因此可以预期它们在生物医学领域的广泛应用。这种涉及免疫亲和磁性颗粒系统的宿主-客体相互作用可以为快速、高效和高纯度的外泌体分离和洗脱提供新的途径,进一步使外泌体在所需区域的应用受益。

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