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2021一种有助于增强磷酸化肽富集的新型表面改性剂的研究-宁波大学-Acs Sustainable Chemistry & Engineering(IF:8.19)
Phosphonate-Functionalized Ionic Liquid: A New Surface Modifier Contributing to the Enhanced Enrichment of Phosphorylated Peptides.
ACS Sustainable Chemistry & Engineering, 2021.
Wang B, Liang W, Liang H, et al.
具有高选择性和检测灵敏度的磷酸肽富集对于磷酸蛋白质组学研究至关重要，并且仍然是一个长期存在的挑战。本研究通过胺化、季铵化、膦酸酯水解和金属固定化反应顺序，成功制备了以膦酸酯官能化离子液体（PFIL）为表面改性剂的新型固定化金属亲和层析纳米复合吸附剂。利用柔性强的三足膦酸盐螯合剂、亲水性离子液体接头、大表面积和尺寸排阻效应的综合特性，所得纳米复合材料 G@mSiO2-PFIL-Ti4+ 表现出优异的检测灵敏度，可富集磷酸化肽，并具有卓越的富集选择性，可从 β-酪蛋白和牛血清白蛋白的消化物混合物（摩尔比为 1:10,000）中捕获磷酸化肽。三足螯合对金属离子的强固定使纳米复合吸附剂对实验条件具有很高的耐受性，从而实现了吸附剂的优异可重复使用性，而富集效率在 10 个循环中没有显着损失。由于优异的尺寸排阻效应，已观察到 G@mSiO2-PFIL-Ti4+ 对磷酸肽的高富集特异性，并从人类唾液中捕获了 23 种内源性磷酸肽。此外，已从小鼠脑裂解物的胰蛋白酶消化物中鉴定出 924 种磷酸肽（富集特异性，56.1%）。特别是，975 个磷酸化位点中有 6 个是 tau 蛋白中与阿尔茨海默病相关的过度磷酸化位点。这些结果表明 G@mSiO2-PFIL-Ti4+ 纳米复合亲和材料在复杂生物样品的蛋白质组学研究中显示出巨大的应用潜力。
本研究涉及维基生物技术服务产品：蛋白质磷酸化修饰位点质谱鉴定